tohidr
20th January 2010, 10:32 PM
كشت بافت گياهي چيست؟
كشت بافت، كشت و نگهداري سلول ها يا اندام هاي گياه در شرایط سترون ، شرايط و تغذيه اي و محيطي حمايت كننده (اين ويترو) است. آن (كشت بافت) كاربردهايي در پژوهش و تجارت دارد. در زمينه هاي تجارتي، كشت بافت عمدتاً براي ازدياد استفاده مي شود و اغلب با عنوان ريزازديادي ذكر مي شود. ريزازديادي به توليد گياهان كامل از طريق كشت هاي سلولي حاصل از جدا كشت ها (قطعه ابتدايي بافت قرار داده شده در كشت) اشاره می کند؛ جدا كشت ها معمولا مرکب از بافت ها هستند كه محتوي سلول هاي مريستمي يا نمو يافته به سلول هاي مريستمي هستند.
شرايط لازم براي تكثير سلول هاي گياهي در اين ويترو چيست؟
آزادي از رقابت
بسياري از آزمايش های كشت بافت اوليه، تا اندازه ای در بخشي، شكست خوردند، زيرا آنها در شرايط استريل نگهداري نمي شدند. قطعات گياهي جدا شده بشدت در رقابت با عوامل بيماريزاي رقيب كه كامل و غيرقابل بازداري هستند، از نظر رشد حقيقي خوب، در محيط كشت، آسيب پذيرند. باكتري ها، قارچ ها و ساير ارگانيسم هایی كه تا اندازه اي مي توانند توسط گياه كامل مقاومت شوند، مي توانند براحتي بدون رقابت با قطعه بافت جدا شده از گياه در محيط نسبتا غني از مواد غذايي فلاسك كشت رشد كنند. بنابراین حذف ارگانيسم هاي رقيب از محیط كشت و جداسازي آن در شرايط ضد عفوني شده ضروري است. اين امر معمولا توسط استريليزاسيون شيميايي سطحي جداكشت با عاملي مانند رنگ بر معین و براي مدتي که عوامل بيماريزا را بدون آسيب رساندن به سلول هاي گياهي ماورای بازیابی، حذف کند يا بکشد، انجام مي شود. همچنين محيط هاي كشت و فلاسک هاي كشت بايد استريل باشند.
مواد غذایی، هورمون هاي مناسب، و حذف فرآورده هاي زاید
وقتي که قسمت كوچكي از گياه جداسازی شده است؛ قادر نيست براي مدت طولاني مواد غذایی و هورمون ها را از گياه دريافت كند، و اينها بايد براي رشد اين ويترو فراهم باشند. تركيب غذايي محيط كشت براي بخش های زيادي مشابه است، هرچند اجزا و مقادير کامل براي گونه هاي مختلف و هدف كشت، متغير خواهد بود. انواع و مقادير هورمون ها به اندازه زيادي متغيرمي باشند. بعلاوه كشت بايد توانايي دفع فرآورده هاي زايد متابوليسم سلول را داشته باشد. اين كار توسط كشت در محيط كشتي معین، كه بصورت دوره اي تجديد مي شود انجام می گردد.
محيطي كنترل شده
كشت هاي بافت، که توسط محيط كشت غذایی نگهداری و در مجراي حفاظتي محدود مي شوند، نيازمند آب و هواي مناسب و ثابت هستند. بنابراين نور و دما بايد بدقت زیاد نسبت به نور و دما که می تواند برای نمونه گياهي كامل باشد تنظيم شوند.
چرا كشت بافت انجام مي شود؟
كشت بافت مزاياي پر معني زيادي را نسبت به روش هاي تكثير سنتي ارائه می دهد:
· تكثير مي تواند بسيار سريعتر از روش تکثیر سنتي باشد.
· این ممکن است در اين ويترو امكان پذير باشد گیاهانی را که تكثير آنها توسط قلمه ها يا ساير روشهاي سنتي بسيار مشكل است تکثیر کنیم.
· توليد تعداد زيادي از كلون هاي از لحاظ ژنتيكي يكسان امكان پذير مي باشد.
· دانه ها مي توانند بدون خطر پوسیدگی یا صید جوانه بزنند.
· تحت شرايط معين، ماده گياهي مي تواند در اين ويترو براي دوره هاي زماني قابل توجه، با نگهداری كم يا بدون نگهداری، ذخيره شود.
· تكنيك هاي كشت بافت براي ريشه كن كردن ويروس، دستكاري ژنتيكی، هيبريداسيون سوماتيكي و ساير روش هايی که برای تكثير، بهبود گياهان، و تحقيقات پايه ای مفید هستند، استفده مي شوند.
كشت بافت، كشت و نگهداري سلول ها يا اندام هاي گياه در شرایط سترون ، شرايط و تغذيه اي و محيطي حمايت كننده (اين ويترو) است. آن (كشت بافت) كاربردهايي در پژوهش و تجارت دارد. در زمينه هاي تجارتي، كشت بافت عمدتاً براي ازدياد استفاده مي شود و اغلب با عنوان ريزازديادي ذكر مي شود. ريزازديادي به توليد گياهان كامل از طريق كشت هاي سلولي حاصل از جدا كشت ها (قطعه ابتدايي بافت قرار داده شده در كشت) اشاره می کند؛ جدا كشت ها معمولا مرکب از بافت ها هستند كه محتوي سلول هاي مريستمي يا نمو يافته به سلول هاي مريستمي هستند.
شرايط لازم براي تكثير سلول هاي گياهي در اين ويترو چيست؟
آزادي از رقابت
بسياري از آزمايش های كشت بافت اوليه، تا اندازه ای در بخشي، شكست خوردند، زيرا آنها در شرايط استريل نگهداري نمي شدند. قطعات گياهي جدا شده بشدت در رقابت با عوامل بيماريزاي رقيب كه كامل و غيرقابل بازداري هستند، از نظر رشد حقيقي خوب، در محيط كشت، آسيب پذيرند. باكتري ها، قارچ ها و ساير ارگانيسم هایی كه تا اندازه اي مي توانند توسط گياه كامل مقاومت شوند، مي توانند براحتي بدون رقابت با قطعه بافت جدا شده از گياه در محيط نسبتا غني از مواد غذايي فلاسك كشت رشد كنند. بنابراین حذف ارگانيسم هاي رقيب از محیط كشت و جداسازي آن در شرايط ضد عفوني شده ضروري است. اين امر معمولا توسط استريليزاسيون شيميايي سطحي جداكشت با عاملي مانند رنگ بر معین و براي مدتي که عوامل بيماريزا را بدون آسيب رساندن به سلول هاي گياهي ماورای بازیابی، حذف کند يا بکشد، انجام مي شود. همچنين محيط هاي كشت و فلاسک هاي كشت بايد استريل باشند.
مواد غذایی، هورمون هاي مناسب، و حذف فرآورده هاي زاید
وقتي که قسمت كوچكي از گياه جداسازی شده است؛ قادر نيست براي مدت طولاني مواد غذایی و هورمون ها را از گياه دريافت كند، و اينها بايد براي رشد اين ويترو فراهم باشند. تركيب غذايي محيط كشت براي بخش های زيادي مشابه است، هرچند اجزا و مقادير کامل براي گونه هاي مختلف و هدف كشت، متغير خواهد بود. انواع و مقادير هورمون ها به اندازه زيادي متغيرمي باشند. بعلاوه كشت بايد توانايي دفع فرآورده هاي زايد متابوليسم سلول را داشته باشد. اين كار توسط كشت در محيط كشتي معین، كه بصورت دوره اي تجديد مي شود انجام می گردد.
محيطي كنترل شده
كشت هاي بافت، که توسط محيط كشت غذایی نگهداری و در مجراي حفاظتي محدود مي شوند، نيازمند آب و هواي مناسب و ثابت هستند. بنابراين نور و دما بايد بدقت زیاد نسبت به نور و دما که می تواند برای نمونه گياهي كامل باشد تنظيم شوند.
چرا كشت بافت انجام مي شود؟
كشت بافت مزاياي پر معني زيادي را نسبت به روش هاي تكثير سنتي ارائه می دهد:
· تكثير مي تواند بسيار سريعتر از روش تکثیر سنتي باشد.
· این ممکن است در اين ويترو امكان پذير باشد گیاهانی را که تكثير آنها توسط قلمه ها يا ساير روشهاي سنتي بسيار مشكل است تکثیر کنیم.
· توليد تعداد زيادي از كلون هاي از لحاظ ژنتيكي يكسان امكان پذير مي باشد.
· دانه ها مي توانند بدون خطر پوسیدگی یا صید جوانه بزنند.
· تحت شرايط معين، ماده گياهي مي تواند در اين ويترو براي دوره هاي زماني قابل توجه، با نگهداری كم يا بدون نگهداری، ذخيره شود.
· تكنيك هاي كشت بافت براي ريشه كن كردن ويروس، دستكاري ژنتيكی، هيبريداسيون سوماتيكي و ساير روش هايی که برای تكثير، بهبود گياهان، و تحقيقات پايه ای مفید هستند، استفده مي شوند.