سید لفته فردزاده
4th August 2015, 05:41 PM
هدف آزمایش
اجزای مختلف یاخته زنده به علت دارا بودن اختلاف غلظت و ضریب شکست بسیار کم به هنگام جذب طیف نور مرئی ، به قدر کافی کنتراست یا اختلاف میزان نور از خودشان نمی‌دهند. رنگهای زیستی ، بدون اینکه اندامکهای یاخته را بی‌جان سازند، آنها را بطور انتخابی رنگ‌آمیزی می‌کنند. هدف آموزشی این کاوش این است که نهایتا بتوانید کارهای زیر را انجام دهید.
انواع یاخته‌های زنده را با رنگهای زیستی (سبز ژانوس و قرمز خنثی) رنگ آمیزی کنید.
انواع یاخته‌های زنده را با رنگهای آبی‌متیلن و نارنجی آکریدین رنگ‌آمیزی کرده و اجزای مربوطه را شناسایی کنید.
یاخته‌های کلروپلاست‌دار را پس از رنگ‌آمیزی زیستی مشاهده و بررسی کنید.
فعالیت 1: رنگ‌آمیزی زیستی خون
چند لام کاملا تمیز را در محلول الکلی 0.004 درصد سبز ژانوس و چند لام تمیز دیگر را در محلول 0.05 الکلی قرمز خنثی فرو برید بطوری که رنگ سطح لامها را کاملا بپوشانید.
لامها را از رنگ خارج کرده و مدتی به حال خود بگذارید تا کاملا خشک شوند. در این حالت رنگ خشک شده باید بطور یکنواخت در سطح لام پخش شده باشد.
روی هر لام یک قطره بسیار کوچک خون قرار دهید.
قطره خون را با لامل بپوشانید بطوری که خون کاملا در زیر آن پخش شود.
اطراف لامل را با لامل مسدود کرده و پس از چند دقیقه لام را با عدسی 100 در زیر میکروسکوپ مطالعه کنید.
پرسشها
در هر یک از لامهایی که با قرمز خنثی و سبز ژانوس رنگ کرده‌اید چه اندامکی را به چه رنگ مشاهده می‌کنید؟
در هر دو نوع لام آیا وقتی که یاخته زنده است، هسته رنگ می‌شوند؟
بارزترین دلیل زیستی بودن رنگ‌آمیزی در این لامهای حاوی یاخته‌های خون چیست؟
فعالیت 2: رنگ‌آمیزی زیستی یاخته‌های پوششی دهان
کمی از مخاط درونی گونه را با لبه لامل تراشیده و یاخته‌ها را در یک قطره محلول نرمال نمک روی لام قرار دهید.
یک قطره محلول آبی 0.01% سبز ژانوس را روی لام بیفزائید و پس از قرار دادن لامل آن را مدت 5 تا 10 دقیقه به حال خود بگذارید.
یاخته‌ها را با استفاده از بزرگنمایی زیاد در زیر میکروسکوپ ببینید.
فعالیت 3: رنگ‌آمیزی زیستی مخمر
یک قطره از سوسپانسیون حاوی مخمر را روی لام قرار و یک قطره محلول آبی 0.01% سبز ژانوس روی آن بریزید چند دقیقه صبر کنید و پس از گذاشتن لامل آن را در زیر میکروسکوپ ببینید.
پرسشها
در این حالت میتوکندری‌ها به چه رنگی درمی‌آیند؟
هسته مخمر به چه رنگی دیده می‌شود؟
فعالیت 4: رنگ‌آمیزی زیستی یاخته‌های کلروپلاست‌دار
برش بسیار نازکی در ساقه گیاه برگ بیدی یا قطعه‌ای از بشره برگ آن را روی لام قرار دهید و سپس یک قطره از محلول رقیق شده رنگ ردامین روی آن بریزید ، چند لحظه صبر کنید. آنگاه پس از گذاردن لامل نمونه را در زیر میکروسکوپ ببینید.
پرسشها
دانه‌های کلروپلاست برگ بیدی به چه رنگ درمی‌آیند؟ آیا سیتوپلاسم و بلورهای آنها نیز رنگ می‌شوند؟
اجزای مختلف یاخته زنده به علت دارا بودن اختلاف غلظت و ضریب شکست بسیار کم به هنگام جذب طیف نور مرئی ، به قدر کافی کنتراست یا اختلاف میزان نور از خودشان نمی‌دهند. رنگهای زیستی ، بدون اینکه اندامکهای یاخته را بی‌جان سازند، آنها را بطور انتخابی رنگ‌آمیزی می‌کنند. هدف آموزشی این کاوش این است که نهایتا بتوانید کارهای زیر را انجام دهید.
انواع یاخته‌های زنده را با رنگهای زیستی (سبز ژانوس و قرمز خنثی) رنگ آمیزی کنید.
انواع یاخته‌های زنده را با رنگهای آبی‌متیلن و نارنجی آکریدین رنگ‌آمیزی کرده و اجزای مربوطه را شناسایی کنید.
یاخته‌های کلروپلاست‌دار را پس از رنگ‌آمیزی زیستی مشاهده و بررسی کنید.
فعالیت 1: رنگ‌آمیزی زیستی خون
چند لام کاملا تمیز را در محلول الکلی 0.004 درصد سبز ژانوس و چند لام تمیز دیگر را در محلول 0.05 الکلی قرمز خنثی فرو برید بطوری که رنگ سطح لامها را کاملا بپوشانید.
لامها را از رنگ خارج کرده و مدتی به حال خود بگذارید تا کاملا خشک شوند. در این حالت رنگ خشک شده باید بطور یکنواخت در سطح لام پخش شده باشد.
روی هر لام یک قطره بسیار کوچک خون قرار دهید.
قطره خون را با لامل بپوشانید بطوری که خون کاملا در زیر آن پخش شود.
اطراف لامل را با لامل مسدود کرده و پس از چند دقیقه لام را با عدسی 100 در زیر میکروسکوپ مطالعه کنید.
پرسشها
در هر یک از لامهایی که با قرمز خنثی و سبز ژانوس رنگ کرده‌اید چه اندامکی را به چه رنگ مشاهده می‌کنید؟
در هر دو نوع لام آیا وقتی که یاخته زنده است، هسته رنگ می‌شوند؟
بارزترین دلیل زیستی بودن رنگ‌آمیزی در این لامهای حاوی یاخته‌های خون چیست؟
فعالیت 2: رنگ‌آمیزی زیستی یاخته‌های پوششی دهان
کمی از مخاط درونی گونه را با لبه لامل تراشیده و یاخته‌ها را در یک قطره محلول نرمال نمک روی لام قرار دهید.
یک قطره محلول آبی 0.01% سبز ژانوس را روی لام بیفزائید و پس از قرار دادن لامل آن را مدت 5 تا 10 دقیقه به حال خود بگذارید.
یاخته‌ها را با استفاده از بزرگنمایی زیاد در زیر میکروسکوپ ببینید.
فعالیت 3: رنگ‌آمیزی زیستی مخمر
یک قطره از سوسپانسیون حاوی مخمر را روی لام قرار و یک قطره محلول آبی 0.01% سبز ژانوس روی آن بریزید چند دقیقه صبر کنید و پس از گذاشتن لامل آن را در زیر میکروسکوپ ببینید.
پرسشها
در این حالت میتوکندری‌ها به چه رنگی درمی‌آیند؟
هسته مخمر به چه رنگی دیده می‌شود؟
فعالیت 4: رنگ‌آمیزی زیستی یاخته‌های کلروپلاست‌دار
برش بسیار نازکی در ساقه گیاه برگ بیدی یا قطعه‌ای از بشره برگ آن را روی لام قرار دهید و سپس یک قطره از محلول رقیق شده رنگ ردامین روی آن بریزید ، چند لحظه صبر کنید. آنگاه پس از گذاردن لامل نمونه را در زیر میکروسکوپ ببینید.
پرسشها
دانه‌های کلروپلاست برگ بیدی به چه رنگ درمی‌آیند؟ آیا سیتوپلاسم و بلورهای آنها نیز رنگ می‌شوند؟